用久了的色譜柱要怎么沖洗

　　衣服穿久了要洗，色譜柱用久了要沖，不過(guò)沖洗色譜柱可不像洗衣服那么簡(jiǎn)單，到底該怎么洗，還是有些門(mén)道的：

　　用什么沖洗色譜柱？

　　什么叫沖洗色譜柱

　　通常，色譜柱沖洗就是把色譜柱上的臟東西和對(duì)色譜柱有損壞的東西沖出來(lái)，并且保存在合適的溶劑中；還有另一種情況，也可以算作沖洗的范疇，就是梯度方法間重新平衡色譜柱的過(guò)程。

　　常用的溶劑

　　針對(duì)于反相色譜柱，通常是用到純的水和有機(jī)溶劑，水主要是作為沖洗掉色譜柱中的鹽和其他添加劑，而有機(jī)溶劑則是用來(lái)沖洗掉一些在色譜柱上有較強(qiáng)保留的污染物，除了在分析中常用到的甲醇和乙腈之外，還有一些對(duì)污染物去除能力更強(qiáng)的有機(jī)溶劑也可以使用，比如異丙醇。

　　如何怎么沖洗色譜柱

　　色譜柱的沖洗，無(wú)非兩個(gè)情況：正常情況下的沖洗和非正常情況下的沖洗

　　正常情況下色譜柱的沖洗步驟

　　使用不含添加劑流動(dòng)相后的沖洗

　　正常情況下，僅僅是對(duì)色譜柱進(jìn)行流動(dòng)相替換和凈化，對(duì)于一般的方法，只需在方法結(jié)束后使用高比例的有機(jī)相比如甲醇或者乙腈沖洗色譜柱大約20倍柱體積即可。

　　使用含鹽或添加劑后的沖洗

　　如果是使用的到的方法的流動(dòng)相中含有緩沖鹽或者其他添加劑的時(shí)候，先要使用和方法流動(dòng)相起始比例相同的純水相替代緩沖鹽一相，沖洗20倍柱體積之后，再換上高比例有機(jī)相沖洗20倍柱體積。

　　色譜柱沖洗后的保存

　　對(duì)于色譜柱的保存，一般是存放在純的有機(jī)相中，短期存放，甲醇乙腈均可，長(zhǎng)期存放，建議儲(chǔ)存在甲醇中。

　　非正常狀況下的沖洗

　　色譜柱如果是非正常的狀況，就要考慮一些不走尋常路的沖洗辦法了：

　　什么叫做非正常狀況？常見(jiàn)的有兩種，柱效下降和堵塞：

　　柱效下降色譜柱的沖洗

　　對(duì)于柱效下降，我們首先要確定是色譜柱的問(wèn)題而不是由于儀器或分析方法造成的，排除這兩者，如果不是色譜柱損壞比如塌陷（物理沖擊造成），鍵合相水解（高溫低pH下長(zhǎng)時(shí)間使用），硅膠基質(zhì)水解（高pH下使用）等不可逆損傷造成的柱效下降，因?yàn)榕懦鲜鰡?wèn)題外，多數(shù)情況都是因?yàn)樯V柱不太正常的“臟”了，可以首先使用純的甲醇或乙腈長(zhǎng)時(shí)間沖洗色譜柱，如果還不能奏效，可以考慮使用純的異丙醇沖洗色譜柱，異丙醇的洗脫能力比甲醇乙腈更強(qiáng)，能把很多這兩種溶劑無(wú)法沖洗的污染物從色譜柱上洗脫下來(lái)。如果效果仍舊不明顯，可以參考色譜柱說(shuō)明書(shū)中的“色譜柱再生”一項(xiàng)里面的說(shuō)法，使用更加強(qiáng)大的溶劑沖洗，不過(guò)這些溶劑通常不是常用的反相液相色譜溶劑。

　　堵塞色譜柱的沖洗

　　如果是遇到堵塞的情況，首先要確定堵塞是由于什么原因引起的，如果是由于色譜柱中殘留的緩沖鹽引起的，這是zui萬(wàn)幸的堵塞了，色譜柱可以嘗試用高比例的水相（推薦95%）在較高的溫度下沖洗色譜柱。

　　如果是由于樣品原因?qū)е律V柱堵塞，又要考慮另外的辦法，如果是樣品中含有太多吸附性很強(qiáng)的物質(zhì)（有時(shí)是復(fù)雜樣品中的某些雜質(zhì)，無(wú)法通過(guò)過(guò)濾離心等辦法去除）沉積吸附在柱頭導(dǎo)致堵塞，可以嘗試使用不同的溶劑（對(duì)此類物質(zhì)有較好溶解性的）慢慢沖洗。

　　如果是由于樣品過(guò)濾不當(dāng)或者樣品在色譜柱上析出導(dǎo)致某些顆粒雜質(zhì)堵塞了色譜柱，除了嘗試尋找合適溶劑沖洗之外，只能考慮反沖了，通常，不建議反沖色譜柱，因?yàn)榭赡軐?duì)色譜柱造成較大損害，所以反沖是迫不得已的死馬當(dāng)活馬醫(yī)的辦法，一定要慎用。做好樣品的前處理并使用預(yù)柱或在線過(guò)濾器才是保護(hù)色譜柱的好辦法！

　　快速?zèng)_洗色譜柱

　　看上去很好很強(qiáng)大的說(shuō)法，其實(shí)很簡(jiǎn)單，在沖洗色譜柱的時(shí)候，可以通過(guò)增加流速來(lái)縮短沖洗時(shí)間，我們已經(jīng)知道色譜柱沖洗的*程度是通過(guò)體積衡量的，所以提高流速是可以節(jié)省下時(shí)間的。但是要特別注意的是，對(duì)于堵塞的色譜柱，提高流速可能并不是個(gè)很可行的辦法。